Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1
Daltoniunie 15, 20210 Comments
Szybka izolacja antygenów z komórek z adsorbentem gronkowcowym białko A-przeciwciało: parametry interakcji kompleksów przeciwciało-antygen z białkiem A.
Tulpina Cowan I a bacteriei Staphylococcus aureus a fost utilizată ca adsorbant pentru anticorpii complexați cu antigeni radiomarcați din lizatele celulare . Această aplicație este avansată ca o alternativă superioară la alte metode de precipitare imună pentru izolarea antigenelor. Acesta exploatează capacitatea ridicată de adsorbție pentru moleculele IgG de către moleculele de proteină A de pe pereții celulari ai anumitor tulpini de stafilococi, împreună cu proprietățile avantajoase de sedimentare ale bacteriilor. Interacțiunea complexelor imune cu adsorbantul a fost definită inițial utilizând un sistem mannequin de albumină serică bovină cu un exces mare de anticorpi anti-albumină serică bovină de iepure (IgG).
Absorbția complexelor imune în aceste condiții a fost extrem de rapidă, având loc în câteva secunde, în timp ce legarea maximă a IgG libere a fost mult mai lentă . În plus, odată legat antigenul complexat nu a putut fi deplasat din adsorbant nici prin cantități mari de IgG normale, nici prin anticorp suplimentar liber. Antigenul ar putea fi eluat aproape complet din adsorbantul inert în scopuri analitice sau preparative cu o varietate de sisteme de solvenți, cum ar fi detergentul SDS în combinație cu uree și temperatură ridicată și săruri neutre cu săruri puternice liotrope în proprietăți.
Eficacitatea tehnicii de adsorbție a anticorpului proteinei A a fost testată în comparații directe cu o metodă convențională de precipitare a anticorpului dublu pentru izolarea limfocitelor IgM de șoarece . Adsorbantul bacterian nu numai că a avut un avantaj distinct în ceea ce privește viteza de izolare a antigenului, dar analizele prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă în SDS au evidențiat, de asemenea, recuperări ale antigenului mai ridicate, niveluri mai scăzute de radioactivitate de fond și absența altor componente celulare care se pot lega nespecific și se pot complica analizele folosind precipitate imune convenționale.
Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1 i jest tłumiony przez wirusowe białko Vif.
Virușii au dezvoltat various strategii non-imune pentru a contracara mecanismele mediate de gazdă care conferă rezistență la infecție. Proteinele Vif (factorul de infectivitate al virionului) sunt codificate de virusurile imunodeficienței primatelor, în particular virusul imunodeficienței umane-1 (HIV-1). Aceste proteine sunt regulatori puternici ai infecției și replicării virusului și, prin urmare, sunt esențiale pentru infecțiile patogene in vivo. HIV-1 Vif pare a fi necesar în timpul etapelor târzii ale producției de virus pentru suprimarea unui fenotip antiviral înnăscut care se află în limfocitele T umane .
Astfel, în absența Vif, expresia acestui fenotip face virionii descendenți neinfecțioși. Aici, descriem o genă celulară unică, CEM15, a cărei expresie tranzitorie sau stabilă în celule care nu exprimă în mod regular CEM15 recreează acest fenotip , dar a cărei acțiune antivirală este depășită de prezența Vif. Deoarece circuitul de reglementare Vif: CEM15 este esențial pentru replicarea HIV-1 , perturbarea circuitului poate fi o țintă promițătoare pentru viitoarele terapii cu HIV / SIDA.
srsf
Predykcyjne korelaty odpowiedzi na przeciwciało anty-PD-L1 MPDL3280A u pacjentów z rakiem.
Dezvoltarea cancerului uman este un proces cu mai multe etape caracterizat prin acumularea de modificări genetice și epigenetice care conduc sau reflectă progresia tumorii. Aceste modificări disting celulele canceroase de omologii lor normali, permițând tumorilor să fie recunoscute ca străine de sistemul imunitar. Cu toate acestea, tumorile sunt rar respinse în mod spontan, reflectând capacitatea lor de a menține un microambient imunosupresor.
Ligand de moarte programat 1 (PD-L1; numit și B7-H1 sau CD274), care se exprimă pe multe celule canceroase și imune , joacă un rol essential în blocarea „ciclului imunității cancerului” prin legarea morții programate-1 (PD- 1) și B7.1 (CD80), ambele fiind regulatori negativi ai activării limfocitelor T. Legarea PD-L1 de receptorii săi suprimă migrația celulelor T , proliferarea și secreția mediatorilor citotoxici și restricționează uciderea celulelor tumorale .
Axa PD-L1-PD-1 protejează gazda de celulele efectoare T hiperactive nu numai în most cancers, ci și în timpul infecțiilor microbiene. Blocarea PD-L1 ar trebui, prin urmare, să sporească imunitatea împotriva cancerului, dar se știe puțin despre factorii predictivi ai eficacității. Acest studiu a fost conceput pentru a evalua siguranța, activitatea și biomarkerii inhibiției PD-L1 utilizând anticorpul umanizat proiectat MPDL3280A.
Aici arătăm că, în mai multe tipuri de most cancers, răspunsurile (astfel cum au fost consider de criteriile de evaluare a răspunsului în tumorile solide, versiunea 1.1) au fost observate la pacienții cu tumori care exprimă niveluri ridicate de PD-L1, mai ales atunci când PD-L1 a fost exprimat prin imunitatea infiltrată în tumori. celule . Mai mult, răspunsurile au fost asociate cu expresia genei T-helper tip 1 (TH1), expresia CTLA4 și absența fractalkinei (CX3CL1) la specimenele tumorale de bază. Împreună, aceste date sugerează că MPDL3280A este cel mai eficient la pacienții la care imunitatea preexistentă este suprimată de PD-L1 și este revigorată în timpul tratamentului cu anticorpi.
Antygen CD4 (T4) jest podstawowym składnikiem receptorora retrowirusa SIDA.
Sindromul imunodeficienței dobândite (SIDA) se caracterizează prin infecții oportuniste și prin „neoplasme oportuniste” (de exemplu, sarcomul Kaposi). Limfadenopatia generalizată persistentă (PGL) este asociată epidemiologic cu SIDA, în particular la bărbații homosexuali. Un subset de limfocite T pozitive pentru antigenul CD4 (numit și antigen T4), este epuizat la pacienții cu SIDA și PGL. Un retrovirus găsit în culturile de celule T de la acești pacienți este puternic implicat în etiologia SIDA din cauza frecvenței ridicate de izolare și a prevalenței anticorpilor specifici la pacienți. Aici am detectat receptori de suprafață celulară pentru retrovirusul SIDA ( celule T umane virusul leucemiei-III (HTLV-III) și izolatele virusului 1 asociate cu limfadenopatie (LAV-1) izolate) prin testarea susceptibilității celulelor la infecția cu pseudotipuri ale virusului stomatitei veziculare care poartă antigeni de înveliș retroviral și prin formarea de sincitii multinucleate pe amestecarea producătoare de virus celule cu receptor purtătoare de celule .
Receptorii au fost prezenți numai pe celulele care exprimă antigen CD4; dintre cei 155 de anticorpi monoclonali testați, fiecare dintre cei 14 anticorpi anti-CD4 a inhibat formarea sincitiilor și a blocat pseudotipurile. Infecție productivă a CD4 + celule cu HTLV-III sau LAV-1 a redus semnificativ de celule de expresie -suprafața de CD4. In distinction, receptorii pentru HTLV-I și HTLV-II nu au fost limitate la CD4 + celule , nu au fost blocate de anticorpi anti-CD4; celulele infectate productiv cu HTLV-I și HTLV-II au exprimat suprafața CD4. Prin urmare, concluzionăm că antigenul CD4 este o componentă esențială și specifică a receptorului pentru agentul cauzal al SIDA.
Komórkowe i molekularne mechanizmy zwłóknienia.
Fibroza este definită de creșterea excesivă, întărirea și / sau cicatrizarea diferitelor țesuturi și este atribuită depunerii în exces a componentelor matricei ularului cu celule suplimentare , inclusiv colagenul. Fibroza este rezultatul closing al reacțiilor inflamatorii cronice induse de o varietate de stimuli, inclusiv infecții persistente, reacții autoimune, răspunsuri alergice, insulte chimice, radiații și leziuni tisulare. Deși tratamentele actuale pentru bolile fibrotice, cum ar fi fibroza pulmonară idiopatică, ciroza hepatică, scleroza sistemică, boala progresivă a rinichilor și fibroza cardiovasculară vizează de obicei inflamațiarăspuns, se acumulează dovezi că mecanismele care conduc fibrogeneza sunt distincte de cele care reglementează inflamația. De fapt, unele studii au sugerat că este necesară inflamația continuă pentru a inversa fibroza stabilită și progresivă.
Mediul cheie al celulelor ular al fibrozei este miofibroblastul, care atunci când este activat servește ca celulă primară producătoare de colagen . Miofibroblastele sunt generate dintr – o varietate de surse , inclusiv mezenchimale rezidente celule , epiteliale și endoteliale celule în procesele fiind denumită epiteliale / endoteliale-mezenchimale (EMT / EndMT) de tranziție, precum și de la circulant fibroblast-like celule numite fibrocite care sunt derivate din măduva osoasă celulele stem .
Miofibroblastele sunt activate de o varietate de mecanisme, inclusiv semnale paracrine derivate din limfocite și macrofage, factori autocrini secretați de miofibroblaste și tipare moleculare asociate cu agenții patogeni (PAMPS) produse de organisme patogene care interacționează cu receptorii de recunoaștere a modelelor (adică TLR) pe fibroblaste. Citokine (IL-13, IL-21, TGF-beta1), chemokine (MCP-1, MIP-1beta), factori angiogenici (VEGF), factori de creștere (PDGF), receptori activați cu proliferatorul peroxizomului (PPAR), proteine de fază acută (SAP), caspazele și componentele sistemului renină-angiotensină-aldosteron (ANG II) au fost identificate ca fiind regulatori importanți ai fibrozei și sunt investigați ca potențiale ținte ale medicamentelor antifibrotice. Această revizuire explorează înțelegerea noastră actuală a ularului celular și a mecanismelor moleculare ale fibrogenezei.
Description: Human VPREB1 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Gentaur can provide custom lentiviral constructs expressing any genes of interest as long as it is less than about 3 kb. Lentiviral technology enables us to efficiently generate stable expression lines which are then selected for moderate or high expressers, depending on the experimental requirements. If you are interested in specific lentiviral DNA constructs or have further questions, please contact us to discuss the details. VPREB3 pre-B lymphocyte 3 [ Homo sapiens ] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/29802
Description: Gentaur can provide custom lentiviral constructs expressing any genes of interest as long as it is less than about 3 kb. Lentiviral technology enables us to efficiently generate stable expression lines which are then selected for moderate or high expressers, depending on the experimental requirements. If you are interested in specific lentiviral DNA constructs or have further questions, please contact us to discuss the details. VPREB1 pre-B lymphocyte 1 [ Homo sapiens ] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/7441
