Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1

Societatea Romana de Stiinte Fiziologice  > immune, miRNA, PCR, peptide >  Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1
srsf

Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1

0 Comments

Szybka izolacja antygenów z komórek z adsorbentem gronkowcowym białko A-przeciwciało: parametry interakcji kompleksów przeciwciało-antygen z białkiem A.

Tulpina Cowan I a bacteriei Staphylococcus aureus a fost utilizată ca adsorbant pentru anticorpii complexați cu antigeni radiomarcați din   lizatele celulare . Această aplicație este avansată ca o alternativă superioară la alte metode de precipitare imună pentru izolarea antigenelor. Acesta exploatează capacitatea ridicată de adsorbție pentru moleculele IgG de către moleculele de proteină A de pe   pereții celulari ai anumitor tulpini de stafilococi, împreună cu proprietățile avantajoase de sedimentare ale bacteriilor. Interacțiunea complexelor imune cu adsorbantul a fost definită inițial utilizând un sistem mannequin de albumină serică bovină cu un exces mare de anticorpi anti-albumină serică bovină de iepure (IgG).

Absorbția complexelor imune în aceste condiții a fost extrem de rapidă, având loc în câteva secunde, în timp ce legarea maximă a IgG libere a fost mult mai lentă . În plus, odată legat antigenul complexat nu a putut fi deplasat din adsorbant nici prin cantități mari de IgG normale, nici prin anticorp suplimentar liber. Antigenul ar putea fi eluat aproape complet din adsorbantul inert în scopuri analitice sau preparative cu o varietate de sisteme de solvenți, cum ar fi detergentul SDS în combinație cu uree și temperatură ridicată și săruri neutre cu săruri puternice liotrope în proprietăți.

Eficacitatea tehnicii de adsorbție a anticorpului proteinei A a fost testată în comparații directe cu o metodă convențională de precipitare a anticorpului dublu pentru izolarea limfocitelor  IgM de șoarece  . Adsorbantul bacterian nu numai că a avut un avantaj distinct în ceea ce privește viteza de izolare a antigenului, dar analizele prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă în SDS au evidențiat, de asemenea, recuperări ale antigenului mai ridicate, niveluri mai scăzute de radioactivitate de fond și absența altor   componente celulare care se pot lega nespecific și se pot complica analizele folosind precipitate imune convenționale.

Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1 i jest tłumiony przez wirusowe białko Vif.

Virușii au dezvoltat various strategii non-imune pentru a contracara mecanismele mediate de gazdă care conferă rezistență la infecție. Proteinele Vif (factorul de infectivitate al virionului) sunt codificate de virusurile imunodeficienței primatelor, în particular virusul imunodeficienței umane-1 (HIV-1). Aceste proteine ​​sunt regulatori puternici ai infecției și replicării virusului și, prin urmare, sunt esențiale pentru infecțiile patogene in vivo. HIV-1 Vif pare a fi necesar în timpul etapelor târzii ale producției de virus pentru suprimarea unui fenotip antiviral înnăscut care se află în limfocitele T umane  .

Astfel, în absența Vif, expresia acestui fenotip face virionii descendenți neinfecțioși. Aici, descriem o genă celulară unică, CEM15, a cărei expresie tranzitorie sau stabilă în  celule  care nu exprimă în mod regular CEM15 recreează acest fenotip , dar a cărei acțiune antivirală este depășită de prezența Vif. Deoarece circuitul de reglementare Vif: CEM15 este esențial pentru replicarea HIV-1 , perturbarea circuitului poate fi o țintă promițătoare pentru viitoarele terapii cu HIV / SIDA.

srsf
srsf

Predykcyjne korelaty odpowiedzi na przeciwciało anty-PD-L1 MPDL3280A u pacjentów z rakiem.

Dezvoltarea cancerului uman este un proces cu mai multe etape caracterizat prin acumularea de modificări genetice și epigenetice care conduc sau reflectă progresia tumorii. Aceste modificări disting celulele  canceroase  de omologii lor normali, permițând tumorilor să fie recunoscute ca străine de sistemul imunitar. Cu toate acestea, tumorile sunt rar respinse în mod spontan, reflectând capacitatea lor de a menține un microambient imunosupresor.

Ligand de moarte programat 1 (PD-L1; numit și B7-H1 sau CD274), care se exprimă pe multe celule canceroase și imune  , joacă un rol essential în blocarea „ciclului imunității cancerului” prin legarea morții programate-1 (PD- 1) și B7.1 (CD80), ambele fiind regulatori negativi ai  activării limfocitelor T. Legarea PD-L1 de receptorii săi suprimă  migrația celulelor T , proliferarea și secreția mediatorilor citotoxici și restricționează  uciderea celulelor tumorale  .

Axa PD-L1-PD-1 protejează gazda de celulele efectoare T hiperactive   nu numai în most cancers, ci și în timpul infecțiilor microbiene. Blocarea PD-L1 ar trebui, prin urmare, să sporească imunitatea împotriva cancerului, dar se știe puțin despre factorii predictivi ai eficacității. Acest studiu a fost conceput pentru a evalua siguranța, activitatea și biomarkerii inhibiției PD-L1 utilizând anticorpul umanizat proiectat MPDL3280A.

Aici arătăm că, în mai multe tipuri de most cancers, răspunsurile (astfel cum au fost consider de criteriile de evaluare a răspunsului în tumorile solide, versiunea 1.1) au fost observate la pacienții cu tumori care exprimă niveluri ridicate de PD-L1, mai ales atunci când PD-L1 a fost exprimat prin imunitatea infiltrată în tumori.  celule . Mai mult, răspunsurile au fost asociate cu expresia genei T-helper tip 1 (TH1), expresia CTLA4 și absența fractalkinei (CX3CL1) la specimenele tumorale de bază. Împreună, aceste date sugerează că MPDL3280A este cel mai eficient la pacienții la care imunitatea preexistentă este suprimată de PD-L1 și este revigorată în timpul tratamentului cu anticorpi.

Antygen CD4 (T4) jest podstawowym składnikiem receptorora retrowirusa SIDA.

Sindromul imunodeficienței dobândite (SIDA) se caracterizează prin infecții oportuniste și prin „neoplasme oportuniste” (de exemplu, sarcomul Kaposi). Limfadenopatia generalizată persistentă (PGL) este asociată epidemiologic cu SIDA, în particular la bărbații homosexuali. Un subset de limfocite T   pozitive pentru antigenul CD4 (numit și antigen T4), este epuizat la pacienții cu SIDA și PGL. Un retrovirus găsit în  culturile de celule T de la acești pacienți este puternic implicat în etiologia SIDA din cauza frecvenței ridicate de izolare și a prevalenței anticorpilor specifici la pacienți. Aici am detectat  receptori de suprafață celulară pentru retrovirusul SIDA ( celule T umane virusul leucemiei-III (HTLV-III) și izolatele virusului 1 asociate cu limfadenopatie (LAV-1) izolate) prin testarea susceptibilității  celulelor  la infecția cu pseudotipuri ale virusului stomatitei veziculare care poartă antigeni de înveliș retroviral și prin formarea de sincitii multinucleate pe amestecarea producătoare de virus  celule  cu receptor purtătoare  de celule .

Receptorii au fost prezenți numai pe  celulele care  exprimă antigen CD4; dintre cei 155 de anticorpi monoclonali testați, fiecare dintre cei 14 anticorpi anti-CD4 a inhibat formarea sincitiilor și a blocat pseudotipurile. Infecție productivă a CD4 +  celule  cu HTLV-III sau LAV-1 a redus semnificativ  de celule de expresie -suprafața de CD4. In distinction, receptorii pentru HTLV-I și HTLV-II nu au fost limitate la CD4 +  celule , nu au fost blocate de anticorpi anti-CD4; celulele  infectate productiv cu HTLV-I și HTLV-II au exprimat suprafața CD4. Prin urmare, concluzionăm că antigenul CD4 este o componentă esențială și specifică a receptorului pentru agentul cauzal al SIDA.

Komórkowe i molekularne mechanizmy zwłóknienia.

Fibroza este definită de creșterea excesivă, întărirea și / sau cicatrizarea diferitelor țesuturi și este atribuită depunerii în exces a componentelor matricei ularului cu celule suplimentare , inclusiv colagenul. Fibroza este rezultatul closing al reacțiilor inflamatorii cronice induse de o varietate de stimuli, inclusiv infecții persistente, reacții autoimune, răspunsuri alergice, insulte chimice, radiații și leziuni tisulare. Deși tratamentele actuale pentru bolile fibrotice, cum ar fi fibroza pulmonară idiopatică, ciroza hepatică, scleroza sistemică, boala progresivă a rinichilor și fibroza cardiovasculară vizează de obicei inflamațiarăspuns, se acumulează dovezi că mecanismele care conduc fibrogeneza sunt distincte de cele care reglementează inflamația. De fapt, unele studii au sugerat că este necesară inflamația continuă pentru a inversa fibroza stabilită și progresivă.

Mediul cheie al  celulelor ular al fibrozei este miofibroblastul, care atunci când este activat servește ca celulă primară producătoare de colagen  . Miofibroblastele sunt generate dintr – o varietate de surse , inclusiv mezenchimale rezidente  celule , epiteliale și endoteliale  celule  în procesele fiind denumită epiteliale / endoteliale-mezenchimale (EMT / EndMT) de tranziție, precum și de la circulant fibroblast-like  celule  numite fibrocite care sunt derivate din măduva osoasă celulele stem  .

Miofibroblastele sunt activate de o varietate de mecanisme, inclusiv semnale paracrine derivate din  limfocite și macrofage, factori autocrini secretați de miofibroblaste și tipare moleculare asociate cu agenții patogeni (PAMPS) produse de organisme patogene care interacționează cu receptorii de recunoaștere a modelelor (adică TLR) pe fibroblaste. Citokine (IL-13, IL-21, TGF-beta1), chemokine (MCP-1, MIP-1beta), factori angiogenici (VEGF), factori de creștere (PDGF), receptori activați cu proliferatorul peroxizomului (PPAR), proteine ​​de fază acută (SAP), caspazele și componentele sistemului renină-angiotensină-aldosteron (ANG II) au fost identificate ca fiind regulatori importanți ai fibrozei și sunt investigați ca potențiale ținte ale medicamentelor antifibrotice. Această revizuire explorează înțelegerea noastră actuală a  ularului celular și a mecanismelor moleculare ale fibrogenezei.

VPREB3 ELISA KIT|Human

EF004206 96 Tests
EUR 826.8

TARGATT? Knock-in Mouse Cell Line Generation Kit (Master Cell Line)

AST-7001 1 Kit Ask for price
Description: 6 month

TARGATT? Knock-in iPSC Generation (Master Cell Line)

AST-1100 1 vial of 1X10^6 cells Ask for price
Description: 6 month

Human VPREB3 shRNA Plasmid

20-abx959234
  • EUR 961.20
  • EUR 1345.20
  • 150 µg
  • 300 µg

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector set (Rat)

K6154001 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector set (Mouse)

K3123201 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

T47D/GFP Cell Line

AKR-208 1 vial
EUR 686.4
Description: T47D/GFP Cell Line stably expresses GFP and otherwise exhibits the same characteristics of the parental cell line.

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector set (Human)

K2617005 3 x 1.0 ug
EUR 451.2

TARGATT? Knock-in CHO Generation Kit (Master Cell Line)

AST-1200 1 Kit Ask for price
Description: 12 month

VPREB3 Recombinant Protein (Human)

RP034357 100 ug Ask for price

VPREB3 ORF Vector (Human) (pORF)

ORF011453 1.0 ug DNA
EUR 114

VPREB3 siRNA

20-abx939489
  • EUR 661.20
  • EUR 878.40
  • 15 nmol
  • 30 nmol

TARGATT? Knock-in HEK293 Generation Kit (Master Cell Line)

AST-1300 1 Kit Ask for price
Description: 12 month

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 1)

K6154002 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 2)

K6154003 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 3)

K6154004 1.0 ug DNA
EUR 184.8

VPREB3 Peptide

42-296P 0.1 mg
EUR 405.6
Description: (IN) VPREB3 Peptide

VPREB3 Antibody

43594-100ul 100ul
EUR 302.4

VPREB3 antibody

70R-21261 50 ul
EUR 522
Description: Rabbit polyclonal VPREB3 antibody

VPREB3 Antibody

DF15982 100ul
EUR 420

VPREB3 Antibody

1-CSB-PA891724LA01HU
  • EUR 380.40
  • EUR 402.00
  • 100ug
  • 50ug
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA

VPREB3 Antibody

1-CSB-PA025888GA01HU
  • EUR 716.40
  • EUR 399.60
  • 150ul
  • 50ul
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA, WB

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 1)

K3123202 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 2)

K3123203 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 3)

K3123204 1.0 ug DNA
EUR 184.8

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Human) (Target 1)

K2617006 1.0 ug DNA
EUR 200.4

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Human) (Target 2)

K2617007 1.0 ug DNA
EUR 200.4

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Human) (Target 3)

K2617008 1.0 ug DNA
EUR 200.4

anti- VPREB3 antibody

FNab09425 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against VPREB3

VPREB3 cloning plasmid

CSB-CL891724HU-10ug 10ug
EUR 279.6
Description: A cloning plasmid for the VPREB3 gene.

293T Cell Lysate (Human embryonic kidney cell line)

LF-R0006 200 ul
EUR 103.2
Description: 293T (Human embryonic kidney cell line) Whole Cell Lysate

VPREB3 Protein Vector (Human) (pPM-C-HA)

PV045811 500 ng
EUR 394.8

VPREB3 Protein Vector (Human) (pPB-C-His)

PV045809 500 ng
EUR 394.8

VPREB3 Protein Vector (Human) (pPB-N-His)

PV045810 500 ng
EUR 394.8

VPREB3 Protein Vector (Human) (pPM-C-His)

PV045812 500 ng
EUR 394.8

VPREB3 Conjugated Antibody

C43594 100ul
EUR 476.4

VPREB3 Polyclonal Antibody

A61726
  • EUR 684.66
  • EUR 117.70
  • EUR 302.50
  • EUR 423.50
  • 100 µg
  • 20 ul
  • 50 ul
  • 100 ul

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector set (Rat)

K6154005 3 x 1.0 ug
EUR 451.2

VPREB1 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU078274 1.0 ml
EUR 1672.8

Vpreb1 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU172112 1.0 ml Ask for price

Vpreb2 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU172113 1.0 ml Ask for price

Vpreb1 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU273237 1.0 ml Ask for price

Vpreb2 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU273238 1.0 ml Ask for price

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector set (Mouse)

K3123205 3 x 1.0 ug
EUR 451.2

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Rat) (Target 1)

K6154006 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Rat) (Target 2)

K6154007 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Rat) (Target 3)

K6154008 1.0 ug DNA
EUR 200.4

VPREB3 Antibody, HRP conjugated

1-CSB-PA891724LB01HU
  • EUR 380.40
  • EUR 402.00
  • 100ug
  • 50ug
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is HRP conjugated. Tested in the following application: ELISA

VPREB3 Recombinant Protein (Rat)

RP236981 100 ug Ask for price

VPREB3 Antibody, FITC conjugated

1-CSB-PA891724LC01HU
  • EUR 380.40
  • EUR 402.00
  • 100ug
  • 50ug
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is FITC conjugated. Tested in the following application: ELISA

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Mouse) (Target 1)

K3123206 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Mouse) (Target 2)

K3123207 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Mouse) (Target 3)

K3123208 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 ORF Vector (Rat) (pORF)

ORF078995 1.0 ug DNA
EUR 607.2

VPREB3 Recombinant Protein (Mouse)

RP184868 100 ug Ask for price

Vpreb1 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU122112 1.0 ml Ask for price

Vpreb2 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU122113 1.0 ml Ask for price

VPREB1 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU028274 1.0 ml
EUR 1672.8

Vpreb1 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU223237 1.0 ml Ask for price

Vpreb2 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU223238 1.0 ml Ask for price

VPREB3 Antibody, Biotin conjugated

1-CSB-PA891724LD01HU
  • EUR 380.40
  • EUR 402.00
  • 100ug
  • 50ug
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is Biotin conjugated. Tested in the following application: ELISA

Vpreb3 ORF Vector (Mouse) (pORF)

ORF061624 1.0 ug DNA
EUR 607.2

Human Pre- B lymphocyte protein 3, VPREB3 ELISA KIT

ELI-51048h 96 Tests
EUR 988.8

Human Pre-B-Lymphocyte Gene 3(VPREB3) ELISA Kit

QY-E01939 96T
EUR 433.2

Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-MCS2]

HR110PA-1 10 ug
EUR 933

Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1a-GFP-T2A-Puro-pA-MCS2]

HR410PA-1 10 ug
EUR 933

VPREB3 Polyclonal Antibody, HRP Conjugated

A61729
  • EUR 684.66
  • EUR 302.50
  • EUR 423.50
  • 100 µg
  • 50 ul
  • 100 ul

Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1a-RFP-T2A-Hygro-pA-MCS2]

HR510PA-1 10 ug
EUR 933

Polyclonal VPREB3 Antibody (internal region)

APG00623G 0.1mg
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Goat that recognizes and binds to Human VPREB3 (internal region). This antibody is tested and proven to work in the following applications:

VPREB3 Polyclonal Antibody, FITC Conjugated

A61728
  • EUR 684.66
  • EUR 302.50
  • EUR 423.50
  • 100 µg
  • 50 ul
  • 100 ul

Pre-B Lymphocyte 3 (VPREB3) Antibody

20-abx114658
  • EUR 878.40
  • EUR 477.60
  • 150 ul
  • 50 ul

VPREB3 Polyclonal Antibody, Biotin Conjugated

A61727
  • EUR 684.66
  • EUR 302.50
  • EUR 423.50
  • 100 µg
  • 50 ul
  • 100 ul

B2M Knockout Jurkat Cell Line

78342 2 vials
EUR 6500
Description: B2M (Beta-2-Microglobulin) has been genetically removed by CRISPR/Cas9 genome editing from Jurkat cells.

TCR Knockout Jurkat Cell Line

78539 2 vials
EUR 6500
Description: The TCR Knockout Jurkat cell line was generated by CRISPR/Cas9 genome editing to remove the TRAC (T-Cell Receptor Alpha Constant) and TRBC1 (T-Cell Receptor Beta Constant 1) domains of the TCRα and β chains.

B2M Knockout THP-1 Cell Line

78389 2 vials
EUR 6500
Description: B2M (Beta-2-Microglobulin) has been genetically removed by CRISPR/Cas9 genome editing from THP-1 cells.

VPREB3 Protein Vector (Rat) (pPM-C-HA)

PV315980 500 ng
EUR 723.6

VPREB3 Protein Vector (Rat) (pPB-C-His)

PV315978 500 ng
EUR 723.6

VPREB3 Protein Vector (Rat) (pPB-N-His)

PV315979 500 ng
EUR 723.6

VPREB3 Protein Vector (Rat) (pPM-C-His)

PV315981 500 ng
EUR 723.6

VPREB3 Protein Vector (Mouse) (pPM-C-HA)

PV246496 500 ng
EUR 723.6

CIITA Knockout THP-1 Cell Line

78390 2 vials
EUR 6500
Description: CIITA (Class II Transactivator) has been genetically removed from THP-1 cells using CRISPR/Cas9 genome editing.

Basic HR Targeting Vector [MCS1-LoxP-MCS2-MCS3-pA-LoxP-MCS4] for Gene Knock-In/Out

HR100PA-1 10 ug
EUR 868

VPREB3 Protein Vector (Mouse) (pPB-C-His)

PV246494 500 ng
EUR 723.6

VPREB3 Protein Vector (Mouse) (pPB-N-His)

PV246495 500 ng
EUR 723.6

VPREB3 Protein Vector (Mouse) (pPM-C-His)

PV246497 500 ng
EUR 723.6

TCR/B2M Knockout Jurkat Cell Line

78552 2 vials
EUR 8645
Description: This cell line is a double knockout of TCR (T Cell Receptor) and B2M (Beta-2-Microglobulin). First, the TRAC (T-Cell Receptor Alpha Constant) and the TRBC1 (T-Cell Receptor Beta Constant 1) domains of the TCRα/β chains were genetically removed by CRISPR/Cas9 genome editing from Jurkat cells to generate the TCR Knockout Jurkat cell Line (BPS Bioscience #78539). These TCR knockout cells were then used to generate a new cell line in which B2M was also genetically removed by CRISPR/Cas9 genome editing.

293AD Cell Line

AD-100 1 vial
EUR 553.2
Description: The 293AD Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase adenovirus production, including firmer attachment and larger surface area.

293AAV Cell Line

AAV-100 1 vial
EUR 609.6
Description: The 293AAV Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase AAV production, including firmer attachment and larger surface area.

293LTV Cell Line

LTV-100 1 vial
EUR 609.6
Description: The 293LTV Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase lentiviral production, including fimrer attachment and larger surface area.

293RTV Cell Line

RV-100 1 vial
EUR 609.6
Description: The 293RTV Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase retroviral production, including fimrer attachment and larger surface area.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *