Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1

Societatea Romana de Stiinte Fiziologice  > immune, miRNA, PCR, peptide >  Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1
srsf

Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1

0 Comments

Szybka izolacja antygenów z komórek z adsorbentem gronkowcowym białko A-przeciwciało: parametry interakcji kompleksów przeciwciało-antygen z białkiem A.

Tulpina Cowan I a bacteriei Staphylococcus aureus a fost utilizată ca adsorbant pentru anticorpii complexați cu antigeni radiomarcați din   lizatele celulare . Această aplicație este avansată ca o alternativă superioară la alte metode de precipitare imună pentru izolarea antigenelor. Acesta exploatează capacitatea ridicată de adsorbție pentru moleculele IgG de către moleculele de proteină A de pe   pereții celulari ai anumitor tulpini de stafilococi, împreună cu proprietățile avantajoase de sedimentare ale bacteriilor. Interacțiunea complexelor imune cu adsorbantul a fost definită inițial utilizând un sistem mannequin de albumină serică bovină cu un exces mare de anticorpi anti-albumină serică bovină de iepure (IgG).

Absorbția complexelor imune în aceste condiții a fost extrem de rapidă, având loc în câteva secunde, în timp ce legarea maximă a IgG libere a fost mult mai lentă . În plus, odată legat antigenul complexat nu a putut fi deplasat din adsorbant nici prin cantități mari de IgG normale, nici prin anticorp suplimentar liber. Antigenul ar putea fi eluat aproape complet din adsorbantul inert în scopuri analitice sau preparative cu o varietate de sisteme de solvenți, cum ar fi detergentul SDS în combinație cu uree și temperatură ridicată și săruri neutre cu săruri puternice liotrope în proprietăți.

Eficacitatea tehnicii de adsorbție a anticorpului proteinei A a fost testată în comparații directe cu o metodă convențională de precipitare a anticorpului dublu pentru izolarea limfocitelor  IgM de șoarece  . Adsorbantul bacterian nu numai că a avut un avantaj distinct în ceea ce privește viteza de izolare a antigenului, dar analizele prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă în SDS au evidențiat, de asemenea, recuperări ale antigenului mai ridicate, niveluri mai scăzute de radioactivitate de fond și absența altor   componente celulare care se pot lega nespecific și se pot complica analizele folosind precipitate imune convenționale.

Izolacja ludzkiego genu, który hamuje zakażenie HIV-1 i jest tłumiony przez wirusowe białko Vif.

Virușii au dezvoltat various strategii non-imune pentru a contracara mecanismele mediate de gazdă care conferă rezistență la infecție. Proteinele Vif (factorul de infectivitate al virionului) sunt codificate de virusurile imunodeficienței primatelor, în particular virusul imunodeficienței umane-1 (HIV-1). Aceste proteine ​​sunt regulatori puternici ai infecției și replicării virusului și, prin urmare, sunt esențiale pentru infecțiile patogene in vivo. HIV-1 Vif pare a fi necesar în timpul etapelor târzii ale producției de virus pentru suprimarea unui fenotip antiviral înnăscut care se află în limfocitele T umane  .

Astfel, în absența Vif, expresia acestui fenotip face virionii descendenți neinfecțioși. Aici, descriem o genă celulară unică, CEM15, a cărei expresie tranzitorie sau stabilă în  celule  care nu exprimă în mod regular CEM15 recreează acest fenotip , dar a cărei acțiune antivirală este depășită de prezența Vif. Deoarece circuitul de reglementare Vif: CEM15 este esențial pentru replicarea HIV-1 , perturbarea circuitului poate fi o țintă promițătoare pentru viitoarele terapii cu HIV / SIDA.

srsf
srsf

Predykcyjne korelaty odpowiedzi na przeciwciało anty-PD-L1 MPDL3280A u pacjentów z rakiem.

Dezvoltarea cancerului uman este un proces cu mai multe etape caracterizat prin acumularea de modificări genetice și epigenetice care conduc sau reflectă progresia tumorii. Aceste modificări disting celulele  canceroase  de omologii lor normali, permițând tumorilor să fie recunoscute ca străine de sistemul imunitar. Cu toate acestea, tumorile sunt rar respinse în mod spontan, reflectând capacitatea lor de a menține un microambient imunosupresor.

Ligand de moarte programat 1 (PD-L1; numit și B7-H1 sau CD274), care se exprimă pe multe celule canceroase și imune  , joacă un rol essential în blocarea „ciclului imunității cancerului” prin legarea morții programate-1 (PD- 1) și B7.1 (CD80), ambele fiind regulatori negativi ai  activării limfocitelor T. Legarea PD-L1 de receptorii săi suprimă  migrația celulelor T , proliferarea și secreția mediatorilor citotoxici și restricționează  uciderea celulelor tumorale  .

Axa PD-L1-PD-1 protejează gazda de celulele efectoare T hiperactive   nu numai în most cancers, ci și în timpul infecțiilor microbiene. Blocarea PD-L1 ar trebui, prin urmare, să sporească imunitatea împotriva cancerului, dar se știe puțin despre factorii predictivi ai eficacității. Acest studiu a fost conceput pentru a evalua siguranța, activitatea și biomarkerii inhibiției PD-L1 utilizând anticorpul umanizat proiectat MPDL3280A.

Aici arătăm că, în mai multe tipuri de most cancers, răspunsurile (astfel cum au fost consider de criteriile de evaluare a răspunsului în tumorile solide, versiunea 1.1) au fost observate la pacienții cu tumori care exprimă niveluri ridicate de PD-L1, mai ales atunci când PD-L1 a fost exprimat prin imunitatea infiltrată în tumori.  celule . Mai mult, răspunsurile au fost asociate cu expresia genei T-helper tip 1 (TH1), expresia CTLA4 și absența fractalkinei (CX3CL1) la specimenele tumorale de bază. Împreună, aceste date sugerează că MPDL3280A este cel mai eficient la pacienții la care imunitatea preexistentă este suprimată de PD-L1 și este revigorată în timpul tratamentului cu anticorpi.

Antygen CD4 (T4) jest podstawowym składnikiem receptorora retrowirusa SIDA.

Sindromul imunodeficienței dobândite (SIDA) se caracterizează prin infecții oportuniste și prin „neoplasme oportuniste” (de exemplu, sarcomul Kaposi). Limfadenopatia generalizată persistentă (PGL) este asociată epidemiologic cu SIDA, în particular la bărbații homosexuali. Un subset de limfocite T   pozitive pentru antigenul CD4 (numit și antigen T4), este epuizat la pacienții cu SIDA și PGL. Un retrovirus găsit în  culturile de celule T de la acești pacienți este puternic implicat în etiologia SIDA din cauza frecvenței ridicate de izolare și a prevalenței anticorpilor specifici la pacienți. Aici am detectat  receptori de suprafață celulară pentru retrovirusul SIDA ( celule T umane virusul leucemiei-III (HTLV-III) și izolatele virusului 1 asociate cu limfadenopatie (LAV-1) izolate) prin testarea susceptibilității  celulelor  la infecția cu pseudotipuri ale virusului stomatitei veziculare care poartă antigeni de înveliș retroviral și prin formarea de sincitii multinucleate pe amestecarea producătoare de virus  celule  cu receptor purtătoare  de celule .

Receptorii au fost prezenți numai pe  celulele care  exprimă antigen CD4; dintre cei 155 de anticorpi monoclonali testați, fiecare dintre cei 14 anticorpi anti-CD4 a inhibat formarea sincitiilor și a blocat pseudotipurile. Infecție productivă a CD4 +  celule  cu HTLV-III sau LAV-1 a redus semnificativ  de celule de expresie -suprafața de CD4. In distinction, receptorii pentru HTLV-I și HTLV-II nu au fost limitate la CD4 +  celule , nu au fost blocate de anticorpi anti-CD4; celulele  infectate productiv cu HTLV-I și HTLV-II au exprimat suprafața CD4. Prin urmare, concluzionăm că antigenul CD4 este o componentă esențială și specifică a receptorului pentru agentul cauzal al SIDA.

Komórkowe i molekularne mechanizmy zwłóknienia.

Fibroza este definită de creșterea excesivă, întărirea și / sau cicatrizarea diferitelor țesuturi și este atribuită depunerii în exces a componentelor matricei ularului cu celule suplimentare , inclusiv colagenul. Fibroza este rezultatul closing al reacțiilor inflamatorii cronice induse de o varietate de stimuli, inclusiv infecții persistente, reacții autoimune, răspunsuri alergice, insulte chimice, radiații și leziuni tisulare. Deși tratamentele actuale pentru bolile fibrotice, cum ar fi fibroza pulmonară idiopatică, ciroza hepatică, scleroza sistemică, boala progresivă a rinichilor și fibroza cardiovasculară vizează de obicei inflamațiarăspuns, se acumulează dovezi că mecanismele care conduc fibrogeneza sunt distincte de cele care reglementează inflamația. De fapt, unele studii au sugerat că este necesară inflamația continuă pentru a inversa fibroza stabilită și progresivă.

Mediul cheie al  celulelor ular al fibrozei este miofibroblastul, care atunci când este activat servește ca celulă primară producătoare de colagen  . Miofibroblastele sunt generate dintr – o varietate de surse , inclusiv mezenchimale rezidente  celule , epiteliale și endoteliale  celule  în procesele fiind denumită epiteliale / endoteliale-mezenchimale (EMT / EndMT) de tranziție, precum și de la circulant fibroblast-like  celule  numite fibrocite care sunt derivate din măduva osoasă celulele stem  .

Miofibroblastele sunt activate de o varietate de mecanisme, inclusiv semnale paracrine derivate din  limfocite și macrofage, factori autocrini secretați de miofibroblaste și tipare moleculare asociate cu agenții patogeni (PAMPS) produse de organisme patogene care interacționează cu receptorii de recunoaștere a modelelor (adică TLR) pe fibroblaste. Citokine (IL-13, IL-21, TGF-beta1), chemokine (MCP-1, MIP-1beta), factori angiogenici (VEGF), factori de creștere (PDGF), receptori activați cu proliferatorul peroxizomului (PPAR), proteine ​​de fază acută (SAP), caspazele și componentele sistemului renină-angiotensină-aldosteron (ANG II) au fost identificate ca fiind regulatori importanți ai fibrozei și sunt investigați ca potențiale ținte ale medicamentelor antifibrotice. Această revizuire explorează înțelegerea noastră actuală a  ularului celular și a mecanismelor moleculare ale fibrogenezei.

CXCL8 CRISPR Knock Out L3.6pl Cell Line

T6220 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

CXCL1 CRISPR Knock Out L3.6pl Cell Line

T6221 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

Ccl2 CRISPR Knock Out CT26 Cell Line

T9611 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

FOLR CRISPR Knock Out Human OVCAR3-A1 Cell Line

T6229 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

MUC16 CRISPR Knock Out Human OVCAR3-A1 Cell Line

T6230 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

NR2F6 CRISPR Knock Out Human Jurkat E6.1 Cell Line - Clone T3-10

T6822 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

TREM2 CRISPR Knock Out Human THP-1 Cell Line - Clone T1-9

T6810 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

PTPN6 CRISPR Knock Out Human THP-1 Cell Line - Clone T3-1

T6813 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

Aldh2 CRISPR Knock Out L929 Cell Line - Clone T3-20

T9692 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

PTPN11 CRISPR Knock Out NIH/3T3 Cell Line - Clone T4-9

T6803 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

METTL3 CRISPR Knock Out Caki-1 Cell Line - Clone T2-16

T9623 1x10^6 cells / 1.0 ml
EUR 3950

Nacc1 CRISPR Knock Out ID8 Cell Line (Mouse) - Clone T1-23

T9627 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

osbpl2 CRISPR Knock Out NIH/3T3 Cell Line - T1 Polyclonal Pool

T9682 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

GLT1 CRISPR Knock Out Rat AST Cell Line - Clone T2-1

T9678 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

PRSS21 CRISPR Knock Out Human OVCAR8 Cell Line - Clone T2 C8

T6811 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

Aifm1 CRISPR Knock Out Mouse L929 Cell Line - Clone T2-15-3

T9674 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

SEC61G CRISPR Knock Out HCC-LM3 Cell Line - Clone T2-17-5

T9746 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

MSLN CRISPR Knock Out Human OVCAR3-A1 Cell Line - Clone T2 C4

T6820 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

CARMIL1 CRISPR Knock Out Immortalized Human Gingival Fibroblast - hTERT Cell Line - T1-2

T6825 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

hPIM1 CRISPR Knock Out SACC-83 Cell Line-T3-9

T9787 1x10^6 cells / 1.0 ml Ask for price

Dcx CRISPR Knock Out C6 Cell Line (Rat) - Clone sg4-1

T9624 1x10^6 cells / 1.0 ml
EUR 3950

Human VPREB1 knockout cell line

ABC-KH16787 1 vial Ask for price
Description: Human VPREB1 knockout cell line is HEK293/HeLa cell line, edited by CRISPR/Cas9 technology.

Human VPREB1 knockdown cell line

ABC-KD16787 1 vial Ask for price
Description: Human VPREB1 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.

Human VPREB3 Over-expressing Stable Cell Line

ABC-X3420 1 vial Ask for price
Description: Gentaur can provide custom lentiviral constructs expressing any genes of interest as long as it is less than about 3 kb. Lentiviral technology enables us to efficiently generate stable expression lines which are then selected for moderate or high expressers, depending on the experimental requirements. If you are interested in specific lentiviral DNA constructs or have further questions, please contact us to discuss the details. VPREB3 pre-B lymphocyte 3 [ Homo sapiens ] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/29802

Cell line gene knock-in and knock-out

S301 -
EUR 15000

VPREB3 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU078275 1.0 ml
EUR 1825.2

Vpreb3 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU172114 1.0 ml Ask for price

Vpreb3 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU273239 1.0 ml Ask for price

Vpreb3 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU122114 1.0 ml Ask for price

VPREB3 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU028275 1.0 ml
EUR 1825.2

Vpreb3 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU223239 1.0 ml Ask for price

VPREB3 sgRNA CRISPR Lentivector set (Human)

K2617001 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

Araf CRISPR Knocked out RAW264.7 Stable cell Cell Line (Mouse) T1-19

T9511 1x10^6 cells / 1.0 ml
EUR 3950

SIRT1 Knockout Stable 293T Cell Line

T3176 1x10^6 cells / 1.0 ml
EUR 3950

VPREB3 sgRNA CRISPR Lentivector (Human) (Target 1)

K2617002 1.0 ug DNA
EUR 184.8

VPREB3 sgRNA CRISPR Lentivector (Human) (Target 2)

K2617003 1.0 ug DNA
EUR 184.8

VPREB3 sgRNA CRISPR Lentivector (Human) (Target 3)

K2617004 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Araf CRISPR Knocked out RAW264.7 Stable cell Cell Line (Mouse) T3-3

T9529 1x10^6 cells/1.0ml
EUR 3950

T47D/GFP Cell Line

AKR-208 1 vial
EUR 686.4
Description: T47D/GFP Cell Line stably expresses GFP and otherwise exhibits the same characteristics of the parental cell line.

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector set (Rat)

K6154001 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

VPREB3 (untagged)-Human pre-B lymphocyte 3 (VPREB3)

SC122793 10 µg Ask for price

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector set (Mouse)

K3123201 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector set (Human)

K2617005 3 x 1.0 ug
EUR 451.2

VPREB3 (GFP-tagged) - Human pre-B lymphocyte 3 (VPREB3)

RG204662 10 µg Ask for price

Stable Mouse Myeloid-derived Suppressor-like LAL Knock Out (HD1B) Cell Line

T3187 1x10^6 cells / 1.0 ml
EUR 3950

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 1)

K6154002 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 2)

K6154003 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 3)

K6154004 1.0 ug DNA
EUR 184.8

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Human) (Target 1)

K2617006 1.0 ug DNA
EUR 200.4

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Human) (Target 2)

K2617007 1.0 ug DNA
EUR 200.4

VPREB3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Human) (Target 3)

K2617008 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 1)

K3123202 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 2)

K3123203 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Vpreb3 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 3)

K3123204 1.0 ug DNA
EUR 184.8

VPREB3 (Myc-DDK-tagged)-Human pre-B lymphocyte 3 (VPREB3)

RC204662 10 µg Ask for price

293T Cell Line

LV010 1x10^6
EUR 450

293T [HEK-293T] Cell Line

CL-0005 1×10⁶ cells/vial
EUR 420
Description: Homo sapiens, Human

VPREB3 ELISA KIT|Human

EF004206 96 Tests
EUR 826.8

Human VPREB3 shRNA Plasmid

20-abx959234
  • Ask for price
  • Ask for price
  • 150 µg
  • 300 µg

Human VPREB1 Over-expressing Stable Cell Line

ABC-X3417 1 vial Ask for price
Description: Gentaur can provide custom lentiviral constructs expressing any genes of interest as long as it is less than about 3 kb. Lentiviral technology enables us to efficiently generate stable expression lines which are then selected for moderate or high expressers, depending on the experimental requirements. If you are interested in specific lentiviral DNA constructs or have further questions, please contact us to discuss the details. VPREB1 pre-B lymphocyte 1 [ Homo sapiens ] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/7441

VPREB3

CSB-CL891724HU 10 μg plasmid + 200μl Glycerol Ask for price

VPREB3 Recombinant Protein (Human)

RP034357 100 ug Ask for price

VPREB3 ORF Vector (Human) (pORF)

ORF011453 1.0 ug DNA
EUR 114

Human VPREB3 Protein Lysate 20ug

IHUVPREB3PLLY20UG each
EUR 213
Description: Human VPREB3 Protein Lysate 20ug

293T/17 Cell Line

CL-0469 1×10⁶ cells/vial
EUR 500
Description: Homo sapiens, Human

VPREB3 siRNA

20-abx939489
  • Ask for price
  • Ask for price
  • 15 nmol
  • 30 nmol

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector set (Rat)

K6154005 3 x 1.0 ug
EUR 451.2

VPREB3 Peptide

42-296P 0.1 mg
EUR 405.6
Description: (IN) VPREB3 Peptide

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector set (Mouse)

K3123205 3 x 1.0 ug
EUR 451.2

VPREB3 Antibody

1-CSB-PA025888GA01HU
  • Ask for price
  • Ask for price
  • 150ul
  • 50ul
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA, WB

VPREB3 Antibody

E043594 100μg/100μl
EUR 255
Description: Available in various conjugation types.

VPREB3 Antibody

DF15982 100ul
EUR 420

VPREB3 Antibody

DF15982-100ul 100ul
EUR 280

VPREB3 Antibody

DF15982-200ul 200ul
EUR 350

VPREB3 Antibody

43594 100ul
EUR 319

VPREB3 Antibody

43594-100ul 100ul
EUR 302.4

VPREB3 antibody

70R-21261 50 ul
EUR 289
Description: Rabbit polyclonal VPREB3 antibody

VPREB3 Antibody

1-CSB-PA891724LA01HU
  • Ask for price
  • Ask for price
  • 100ug
  • 50ug
Description: A polyclonal antibody against VPREB3. Recognizes VPREB3 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA

293T Cell Lysate (Human embryonic kidney cell line)

LF-R0006 200 ul
EUR 103.2
Description: 293T (Human embryonic kidney cell line) Whole Cell Lysate

293AD Cell Line

AD-100 1 vial
EUR 365

293AAV Cell Line

AAV-100 1 vial
EUR 405

293RTV Cell Line

RV-100 1 vial
EUR 405

293LTV Cell Line

LTV-100 1 vial
EUR 405

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Rat) (Target 1)

K6154006 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Rat) (Target 2)

K6154007 1.0 ug DNA
EUR 200.4

Vpreb3 sgRNA CRISPR/Cas9 All-in-One Lentivector (Rat) (Target 3)

K6154008 1.0 ug DNA
EUR 200.4

VPREB1 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU078274 1.0 ml
EUR 1672.8

Vpreb1 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU172112 1.0 ml Ask for price

Vpreb2 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU172113 1.0 ml Ask for price

Vpreb1 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU273237 1.0 ml Ask for price

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *