Wykrywanie i izolacja cząstek retrowirusa typu C ze świeżych i hodowanych
Daltoniunie 11, 20210 Comments
Wykrywanie i izolacja cząstek retrowirusa typu C ze świeżych i hodowanych limfocytów pacjenta ze skórnym chłoniakiem T-komórkowym.
Particule de retrovirus cu morfologie de tip C au fost găsite în două linii celulare limfoblastoidiene de celule T , HUT 102 și CTCL-3, și în limfocite proaspete de sânge periferic obținute de la un pacient cu limfom cutanat cu celule T (micoză fungoidă). Liniile celulare produc continuu aceste virusuri, care sunt denumite în mod colectiv HTLV, tulpina CR (HTLV (CR)).
Inițial, producția de virus din celulele HUT 102 a necesitat inducerea cu 5-iodo-2′-deoxiuridină, dar linia celulară a devenit un producător constitutiv de virus la pasajul 56. Linia celulară CTCL-Three a fost un producător constitutiv de virus de la al doilea pasaj în cultură.
Ambele particule de virus ular celular additional matur și imatur au fost observate în micrografii electronice cu secțiune subțire de materials ular repair cu celule peletate ; ocazional, s-au văzut particule tipice de virus în devenire de tip C. Nu s-a văzut nicio formă de particulă de virus ular intra celular .
Particulele mature aveau un diametru de 100-110 nm, constau dintr-un miez dens de electroni înconjurat de o membrană exterioară separată de o regiune electron-lucentă, bandată la o densitate de 1,16 g / ml pe un gradient continuu de zaharoză de 25-65% și conținea ARN 70S și o activitate ADN polimerază tipică pentru transcriptaza inversă virală (RT; ADN nucleotidiltransferază dependentă de ARN). În anumite condiții de testare, HTLV (CR) RT a arătat preferința cationică pentru Mg (2+) față de Mn (2+), distinctă de caracteristicile ADN polimeraze celulare ular purificate din limfocite umane și RT din majoritatea virusurilor de tip C.
Anticorpii împotriva ADN polimerazei ular celulare gamma și anticorpilor împotriva RT purificați din mai multe retrovirusuri animale nu au reușit să interacționeze detectabil cu HTLV (CR) RT în condiții pozitive pentru ADN polimeraza omologă respectivă, demonstrând lipsa unei relații strânse de HTLV ) RT la ADN polimeraze celulare ular gamma sau RT ale acestor virusuri. Șase proteine majore, cu dimensiuni de aproximativ 10.000, 13.000, 19.000, 24.000, 42.000 și 52.000 daltoni, au fost evidente atunci când particulele HTLV (CR) dublu bandate și perturbate au fost cromatografiate pe o NaDodSO (4) / poliacrilamidăgel. Numărul acestor proteine asociate particulelor este în concordanță cu proteinele așteptate ale unui retrovirus, dar dimensiunile unora sunt diferite de cele ale celor mai cunoscute retrovirusuri ale subgrupurilor de primate.
Izolacja retrowirusa limfotropowego T od pacjenta z ryzykiem zespołu nabytego niedoboru odporności (AIDS).
Un retrovirus aparținând familiei virusurilor leucemice cu celule T umane (HTLV) current descoperite , dar clar distinct de fiecare izolat anterior, a fost izolat de la un pacient caucazian cu semne și simptome care preced adesea sindromului imunodeficienței dobândite (SIDA). Acest virus este un virus tumoral tipic ARN tip C, muguri din membrana celulară , preferă magneziul pentru activitatea de transcriptază inversă și are un antigen intern (p25) comparable cu HTLV p24.
Anticorpii din serul acestui pacient reacționează cu proteinele din virusurile subgrupului HTLV-I, dar antiserurile de tip particular la HTLV-I nu precipită proteinele noului izolat. Virusul de la acest pacient a fost transmis în limfocitele din sângele cordonului ombilical , iar virusul produs de aceste celule este comparable cu izolatul unique. Din aceste studii se concluzionează că acest virus, precum și izolatele anterioare HTLV aparțin unei familii generale de retrovirusuri T-limfotrope care se transmit orizontal la om și pot fi implicate în mai multe sindroame patologice, inclusiv SIDA.
srsf
Zaangażowanie imunoinhibitorowego receptora PD-1 przez nowego członka rodziny B7 prowadzi do negatywnej regulacji aktywacji limfocytów.
PD-1 este un receptor imunoinhibitor exprimat de celule T activate , celule B și celule mieloide . Șoarecii deficienți în PD-1 prezintă o defalcare a toleranței periferice și demonstrează a number of caracteristici autoimune. Raportăm aici că ligandul PD-1 (PD-L1) este un membru al familiei genelor B7. Angajarea PD-1 de către PD-L1 duce la inhibarea proliferării limfocitelor mediate de receptorul celulelor T și a secreției de citokine. În plus, semnalizarea PD-1 poate inhiba cel puțin niveluri suboptimale de costimulare mediată de CD28. PD-L1 este exprimat de celule care prezintă antigen , inclusiv monocite de sânge periferic uman stimulate cu interferon gamma și dendritic uman și murin activat celule .
În plus, PD-L1 este exprimat în țesuturi nelimfoide, cum ar fi inima și plămânii. Nivelurile relative de inhibare a PD-L1 și costimulare B7-1 / B7-2 semnalelor pe prezentatoare de antigen celule poate determina gradul de T cu celule de activare și , prin urmare , pragul dintre toleranță și autoimunitate. Expresia PD-L1 pe țesuturile nelimfoide și interacțiunea sa potențială cu PD-1 pot determina ulterior amploarea răspunsurilor imune la locurile de inflamație.
U myszy z niedoborem interleukiny 10 rozwija się przewlekłe zapalenie jelit.
Interleukina-10 (IL-10) afectează creșterea și diferențierea multor celule hemopoietice in vitro; în particular, este un puternic supresor al funcțiilor macrofagelor și celulelor T. La șoarecii cu deficiență de IL-10, generați prin direcționarea genelor, dezvoltarea limfocitelor și răspunsurile la anticorpi sunt normale, dar majoritatea animalelor sunt retardate în creștere și anemice și suferă de enterocolită cronică. Modificările intestinului includ hiperplazie mucoasă extinsă, reacții inflamatorii și expresia aberantă a moleculelor majore de complicated de histocompatibilitate clasa II pe epitelii.
În schimb, mutanții păstrați în condiții specifice fără patogeni dezvoltă doar o inflamație locală limitată la colonul proximal. Aceste rezultate indică faptul că inflamația intestinului la mutanți provine din răspunsuri imune necontrolate stimulate de antigeni enterici și că IL-10 este un imunoreglator esențial în tractul intestinal.
Prosta technika ilościowego określania niskich poziomów uszkodzeń DNA w poszczególnych komórkach.
Limfocitele umane au fost fie expuse la iradiere X (25 până la 200 rads), fie tratate cu H2O2 (9,1 până la 291 microM) la Four grade C și gradul de migrare a ADN-ului a fost măsurat folosind o tehnică de electroforeză cu microgel unicelular în condiții alcaline. Ambii agenți au indus o creștere semnificativă a migrației ADN, începând cu cea mai mică doză evaluată.
Modelele de migrație au fost relativ omogene între celulele expuse la raze X, dar eterogene între celulele tratate cu H2O2. O analiză a cineticii de reparație după expunerea la raze X de 200 rads a fost efectuată cu limfocite obținute de la trei persoane. Cea mai mare parte a reparației ADN a avut loc în primele 15 minute, în timp ce toată reparația a fost în esență completă la 120 de minute după expunere. Cu toate acestea, unele celule nu au demonstrat nicio reparație în această perioadă de incubație, în timp ce alte celule au demonstrat modele de migrare a ADN care indică mai multe daune decât cele induse de iradierea inițială cu raze X. Această tehnică pare a fi sensibilă și utilă pentru detectarea daunelor și repararea în celule unice .
AAVS1 Positive Control EGIP 293T Reporter Cell Line
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human, Mouse. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA, WB, IHC;ELISA:1:1000-1:2000, WB:1:500-1:2000, IHC:1:25-1:100
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA, IHC; Recommended dilution: IHC:1:20-1:200
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA, WB, IHC
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human. This antibody is Unconjugated. Tested in the following application: ELISA, IHC; Recommended dilution: IHC:1:20-1:200
Description: The 293AAV Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase AAV production, including firmer attachment and larger surface area.
Description: The 293AD Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase adenovirus production, including firmer attachment and larger surface area.
Description: The 293LTV Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase lentiviral production, including fimrer attachment and larger surface area.
Description: The 293RTV Cell Line is derived from the parental 293 cells but selected for attributes that increase retroviral production, including fimrer attachment and larger surface area.
Description: A polyclonal antibody for detection of LY96 from Human, Mouse. This LY96 antibody is for WB, ELISA. It is affinity-purified from rabbit serum by affinity-chromatography using the specific immunogenand is unconjugated. The antibody is produced in rabbit by using as an immunogen synthesized peptide derived from part region of human LY96 protein
Description: A polyclonal antibody for detection of LY96 from Human, Mouse. This LY96 antibody is for WB, ELISA. It is affinity-purified from rabbit serum by affinity-chromatography using the specific immunogenand is unconjugated. The antibody is produced in rabbit by using as an immunogen synthesized peptide derived from part region of human LY96 protein
Description: A polyclonal antibody for detection of LY96 from Human, Mouse. This LY96 antibody is for WB, ELISA. It is affinity-purified from rabbit serum by affinity-chromatography using the specific immunogenand is unconjugated. The antibody is produced in rabbit by using as an immunogen synthesized peptide derived from part region of human LY96 protein
Description: This gene encodes a protein which associates with toll-like receptor 4 on the cell surface and confers responsiveness to lipopolysaccyaride (LPS), thus providing a link between the receptor and LPS signaling. Studies of the mouse ortholog suggest that this gene may be involved in endotoxin neutralization. Alternative splicing results in multiple transcript variants encoding different isoforms.
Description: Description of target: This gene encodes a protein which associates with toll-like receptor 4 on the cell surface and confers responsiveness to lipopolysaccyaride (LPS), thus providing a link between the receptor and LPS signaling. Studies of the mouse ortholog suggest that this gene may be involved in endotoxin neutralization. Alternative splicing results in multiple transcript variants encoding different isoforms.;Species reactivity: Human;Application: ELISA;Assay info: Assay Methodology: Quantitative Sandwich ELISA;Sensitivity: 0.062 ng/mL
Description: Description of target: Binds bacterial lipopolysaccharide (LPS). Cooperates with TLR4 in the innate immune response to bacterial lipopolysaccharide (LPS), and with TLR2 in the response to cell wall components from Gram-positive and Gram-negative bacteria. Enhances TLR4-dependent activation of NF-kappa-B. Cells expressing both LY96 and TLR4, but not TLR4 alone, respond to LPS.;Species reactivity: Human;Application: ;Assay info: Assay Methodology: Quantitative Sanadwich ELISA;Sensitivity: 31.25 pg/mL
Description: Description of target: This gene encodes a protein which associates with toll-like receptor 4 on the cell surface and confers responsiveness to lipopolysaccyaride (LPS), thus providing a link between the receptor and LPS signaling. Studies of the mouse ortholog suggest that this gene may be involved in endotoxin neutralization. Alternative splicing results in multiple transcript variants encoding different isoforms.;Species reactivity: Human;Application: ;Assay info: Quantitative Sandwich ELISA;Sensitivity: < 0.06 ng/mL
Description: Description of target: Binds bacterial lipopolysaccharide (LPS) (PubMed:17803912, PubMed:17569869). Cooperates with TLR4 in the innate immune response to bacterial lipopolysaccharide (LPS), and with TLR2 in the response to cell wall components from Gram-positive and Gram-negative bacteria (PubMed:11160242, PubMed:11593030). Enhances TLR4-dependent activation of NF-kappa-B (PubMed:10359581). Cells expressing both LY96 and TLR4, but not TLR4 alone, respond to LPS (PubMed:10359581).5 Publications
<p>Manually curated information for which there is published experimental evidence.</p>
<p><a href="/manual/evidences#ECO:0000269">More…</a></p> Manual assertion based on experiment iniRef.1"MD-2, a molecule that confers lipopolysaccharide responsiveness on Toll-like receptor 4."_x005F_x005F_x000D_Shimazu R., Akashi S., Ogata H., Nagai Y., Fukudome K., Miyake K., Kimoto M._x005F_x005F_x000D_J. Exp. Med. 189:1777-1782(1999) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]Cited for: NUCLEOTIDE SEQUENCE [MRNA] (ISOFORM 1), VARIANT GLY-56, FUNCTION, INTERACTION WITH TLR4, SUBCELLULAR LOCATION.Ref.8"MD-2 enables Toll-like receptor 2 (TLR2)-mediated responses to lipopolysaccharide and enhances TLR2-mediated responses to Gram-positive and Gram-negative bacteria and their cell wall components."_x005F_x005F_x000D_Dziarski R., Wang Q., Miyake K., Kirschning C.J., Gupta D._x005F_x005F_x000D_J. Immunol. 166:1938-1944(2001) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]Cited for: INTERACTION WITH TLR2 AND TLR4, FUNCTION.Ref.9"Secreted MD-2 is a large polymeric protein that efficiently confers lipopolysaccharide sensitivity to Toll-like receptor 4."_x005F_x005F_x000D_Visintin A., Mazzoni A., Spitzer J.A., Segal D.M._x005F_x005F_x000D_Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98:12156-12161(2001) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]Cited for: DISULFIDE BONDS, GLYCOSYLATION, SUBCELLULAR LOCATION, FUNCTION, INTERACTION WITH TLR4.Ref.11"Crystal structure of the TLR4-MD-2 complex with bound endotoxin antagonist Eritoran."_x005F_x005F_x000D_Kim H.M., Park B.S., Kim J.-I., Kim S.E., Lee J., Oh S.C., Enkhbayar P., Matsushima N., Lee H., Yoo O.J., Lee J.-O._x005F_x005F_x000D_Cell 130:906-917(2007) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]Cited for: X-RAY CRYSTALLOGRAPHY (1.7 ANGSTROMS) OF 19-158 IN COMPLEX WITH TLR4 AND LIPOPOLYSACCHARIDE ANALOG, SUBUNIT.Ref.12"Crystal structures of human MD-2 and its complex with antiendotoxic lipid IVa."_x005F_x005F_x000D_Ohto U., Fukase K., Miyake K., Satow Y._x005F_x005F_x000D_Science 316:1632-1634(2007) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract]Cited for: X-RAY CRYSTALLOGRAPHY (2.0 ANGSTROMS) OF 17-160 IN COMPLEX WITH LIPID IV-A, DISULFIDE BONDS, GLYCOSYLATION AT ASN-26 AND ASN-114. ;Species reactivity: Human;Application: ELISA;Assay info: Assay Methodology: Quantitative Sandwich Immunoassay;Sensitivity: < 0.062 ng/mL
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human. This antibody is HRP conjugated. Tested in the following application: ELISA
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human. This antibody is FITC conjugated. Tested in the following application: ELISA
Description: A polyclonal antibody against LY96. Recognizes LY96 from Human. This antibody is Biotin conjugated. Tested in the following application: ELISA
Description: Conventional cells used for retrovirus packaging, such as those based on NIH3T3 cells, have limited stability and produce relatively low yields of retrovirus, mainly due to the poor expression of retroviral structure proteins (gag, pol and env) in the cells. The Platinum Retroviral Packaging Cell Lines are based on the 293T cell line. They exhibit longer stability and produce higher yields of retroviral structure proteins. Plat-E cells contain gag, pol and env genes, allowing retroviral packaging with a single plasmid transfection.
Description: Conventional cells used for retrovirus packaging, such as those based on NIH3T3 cells, have limited stability and produce relatively low yields of retrovirus, mainly due to the poor expression of retroviral structure proteins (gag, pol and env) in the cells. The Platinum Retroviral Packaging Cell Lines are based on the 293T cell line. They exhibit longer stability and produce higher yields of retroviral structure proteins. Plat-A cells contain gag, pol and env genes, allowing retroviral packaging with a single plasmid transfection.
Description: Conventional cells used for retrovirus packaging, such as those based on NIH3T3 cells, have limited stability and produce relatively low yields of retrovirus, mainly due to the poor expression of retroviral structure proteins (gag, pol and env) in the cells. The Platinum Retroviral Packaging Cell Lines are based on the 293T cell line. They exhibit longer stability and produce higher yields of retroviral structure proteins. Plat-GP cells contain the gag and pol genes required for retroviral packaging; an expression vector is co-transfected with a VSVG envelope vector.
Total Protein - Murine Embryonic Stem Cell Line D3
Description: Quantitativesandwich ELISA kit for measuring Human Lymphocyte antigen 96 (LY96) in samples from serum, plasma, tissue homogenates. A new trial version of the kit, which allows you to test the kit in your application at a reasonable price.
Description: Quantitativesandwich ELISA kit for measuring Human Lymphocyte antigen 96(LY96) in samples from serum, plasma, tissue homogenates. Now available in a cost efficient pack of 5 plates of 96 wells each, conveniently packed along with the other reagents in 5 separate kits.
Description: This is Double-antibody Sandwich Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Human Lymphocyte Antigen 96 (LY96) in tissue homogenates, cell lysates and other biological fluids.
Description: This is Double-antibody Sandwich Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Human Lymphocyte Antigen 96 (LY96) in tissue homogenates, cell lysates and other biological fluids.
Description: This is Double-antibody Sandwich Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Human Lymphocyte Antigen 96 (LY96) in tissue homogenates, cell lysates and other biological fluids.
Description: This is Double-antibody Sandwich Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Human Lymphocyte Antigen 96 (LY96) in tissue homogenates, cell lysates and other biological fluids.
Description: Enzyme-linked immunosorbent assay based on the Double-antibody Sandwich method for detection of Human Lymphocyte Antigen 96 (LY96) in samples from tissue homogenates, cell lysates and other biological fluids with no significant corss-reactivity with analogues from other species.
Description: A polyclonal antibody raised in Rabbit that recognizes and binds to Human LY96 (C-term). This antibody is tested and proven to work in the following applications:
Description: Description of target: Binds bacterial lipopolysaccharide (LPS) (PubMed:22532668). Cooperates with TLR4 in the innate immune response to bacterial lipopolysaccharide (LPS), and with TLR2 in the response to cell wall components from Gram-positive and Gram-negative bacteria. Enhances TLR4-dependent activation of NF-kappa-B. Cells expressing both LY96 and TLR4, but not TLR4 alone, respond to LPS (PubMed:10725698).;Species reactivity: Mouse;Application: ;Assay info: Assay Methodology: Quantitative Sanadwich ELISA;Sensitivity: 0.039 ng/mL
