Wykrywanie i izolacja cząstek retrowirusa typu C ze świeżych i hodowanych
Daltoniunie 11, 20210 Comments
Wykrywanie i izolacja cząstek retrowirusa typu C ze świeżych i hodowanych limfocytów pacjenta ze skórnym chłoniakiem T-komórkowym.
Particule de retrovirus cu morfologie de tip C au fost găsite în două linii celulare limfoblastoidiene de celule T , HUT 102 și CTCL-3, și în limfocite proaspete de sânge periferic obținute de la un pacient cu limfom cutanat cu celule T (micoză fungoidă). Liniile celulare produc continuu aceste virusuri, care sunt denumite în mod colectiv HTLV, tulpina CR (HTLV (CR)).
Inițial, producția de virus din celulele HUT 102 a necesitat inducerea cu 5-iodo-2′-deoxiuridină, dar linia celulară a devenit un producător constitutiv de virus la pasajul 56. Linia celulară CTCL-Three a fost un producător constitutiv de virus de la al doilea pasaj în cultură.
Ambele particule de virus ular celular additional matur și imatur au fost observate în micrografii electronice cu secțiune subțire de materials ular repair cu celule peletate ; ocazional, s-au văzut particule tipice de virus în devenire de tip C. Nu s-a văzut nicio formă de particulă de virus ular intra celular .
Particulele mature aveau un diametru de 100-110 nm, constau dintr-un miez dens de electroni înconjurat de o membrană exterioară separată de o regiune electron-lucentă, bandată la o densitate de 1,16 g / ml pe un gradient continuu de zaharoză de 25-65% și conținea ARN 70S și o activitate ADN polimerază tipică pentru transcriptaza inversă virală (RT; ADN nucleotidiltransferază dependentă de ARN). În anumite condiții de testare, HTLV (CR) RT a arătat preferința cationică pentru Mg (2+) față de Mn (2+), distinctă de caracteristicile ADN polimeraze celulare ular purificate din limfocite umane și RT din majoritatea virusurilor de tip C.
Anticorpii împotriva ADN polimerazei ular celulare gamma și anticorpilor împotriva RT purificați din mai multe retrovirusuri animale nu au reușit să interacționeze detectabil cu HTLV (CR) RT în condiții pozitive pentru ADN polimeraza omologă respectivă, demonstrând lipsa unei relații strânse de HTLV ) RT la ADN polimeraze celulare ular gamma sau RT ale acestor virusuri. Șase proteine majore, cu dimensiuni de aproximativ 10.000, 13.000, 19.000, 24.000, 42.000 și 52.000 daltoni, au fost evidente atunci când particulele HTLV (CR) dublu bandate și perturbate au fost cromatografiate pe o NaDodSO (4) / poliacrilamidăgel. Numărul acestor proteine asociate particulelor este în concordanță cu proteinele așteptate ale unui retrovirus, dar dimensiunile unora sunt diferite de cele ale celor mai cunoscute retrovirusuri ale subgrupurilor de primate.
Izolacja retrowirusa limfotropowego T od pacjenta z ryzykiem zespołu nabytego niedoboru odporności (AIDS).
Un retrovirus aparținând familiei virusurilor leucemice cu celule T umane (HTLV) current descoperite , dar clar distinct de fiecare izolat anterior, a fost izolat de la un pacient caucazian cu semne și simptome care preced adesea sindromului imunodeficienței dobândite (SIDA). Acest virus este un virus tumoral tipic ARN tip C, muguri din membrana celulară , preferă magneziul pentru activitatea de transcriptază inversă și are un antigen intern (p25) comparable cu HTLV p24.
Anticorpii din serul acestui pacient reacționează cu proteinele din virusurile subgrupului HTLV-I, dar antiserurile de tip particular la HTLV-I nu precipită proteinele noului izolat. Virusul de la acest pacient a fost transmis în limfocitele din sângele cordonului ombilical , iar virusul produs de aceste celule este comparable cu izolatul unique. Din aceste studii se concluzionează că acest virus, precum și izolatele anterioare HTLV aparțin unei familii generale de retrovirusuri T-limfotrope care se transmit orizontal la om și pot fi implicate în mai multe sindroame patologice, inclusiv SIDA.
srsf
Zaangażowanie imunoinhibitorowego receptora PD-1 przez nowego członka rodziny B7 prowadzi do negatywnej regulacji aktywacji limfocytów.
PD-1 este un receptor imunoinhibitor exprimat de celule T activate , celule B și celule mieloide . Șoarecii deficienți în PD-1 prezintă o defalcare a toleranței periferice și demonstrează a number of caracteristici autoimune. Raportăm aici că ligandul PD-1 (PD-L1) este un membru al familiei genelor B7. Angajarea PD-1 de către PD-L1 duce la inhibarea proliferării limfocitelor mediate de receptorul celulelor T și a secreției de citokine. În plus, semnalizarea PD-1 poate inhiba cel puțin niveluri suboptimale de costimulare mediată de CD28. PD-L1 este exprimat de celule care prezintă antigen , inclusiv monocite de sânge periferic uman stimulate cu interferon gamma și dendritic uman și murin activat celule .
În plus, PD-L1 este exprimat în țesuturi nelimfoide, cum ar fi inima și plămânii. Nivelurile relative de inhibare a PD-L1 și costimulare B7-1 / B7-2 semnalelor pe prezentatoare de antigen celule poate determina gradul de T cu celule de activare și , prin urmare , pragul dintre toleranță și autoimunitate. Expresia PD-L1 pe țesuturile nelimfoide și interacțiunea sa potențială cu PD-1 pot determina ulterior amploarea răspunsurilor imune la locurile de inflamație.
U myszy z niedoborem interleukiny 10 rozwija się przewlekłe zapalenie jelit.
Interleukina-10 (IL-10) afectează creșterea și diferențierea multor celule hemopoietice in vitro; în particular, este un puternic supresor al funcțiilor macrofagelor și celulelor T. La șoarecii cu deficiență de IL-10, generați prin direcționarea genelor, dezvoltarea limfocitelor și răspunsurile la anticorpi sunt normale, dar majoritatea animalelor sunt retardate în creștere și anemice și suferă de enterocolită cronică. Modificările intestinului includ hiperplazie mucoasă extinsă, reacții inflamatorii și expresia aberantă a moleculelor majore de complicated de histocompatibilitate clasa II pe epitelii.
În schimb, mutanții păstrați în condiții specifice fără patogeni dezvoltă doar o inflamație locală limitată la colonul proximal. Aceste rezultate indică faptul că inflamația intestinului la mutanți provine din răspunsuri imune necontrolate stimulate de antigeni enterici și că IL-10 este un imunoreglator esențial în tractul intestinal.
Prosta technika ilościowego określania niskich poziomów uszkodzeń DNA w poszczególnych komórkach.
Limfocitele umane au fost fie expuse la iradiere X (25 până la 200 rads), fie tratate cu H2O2 (9,1 până la 291 microM) la Four grade C și gradul de migrare a ADN-ului a fost măsurat folosind o tehnică de electroforeză cu microgel unicelular în condiții alcaline. Ambii agenți au indus o creștere semnificativă a migrației ADN, începând cu cea mai mică doză evaluată.
Modelele de migrație au fost relativ omogene între celulele expuse la raze X, dar eterogene între celulele tratate cu H2O2. O analiză a cineticii de reparație după expunerea la raze X de 200 rads a fost efectuată cu limfocite obținute de la trei persoane. Cea mai mare parte a reparației ADN a avut loc în primele 15 minute, în timp ce toată reparația a fost în esență completă la 120 de minute după expunere. Cu toate acestea, unele celule nu au demonstrat nicio reparație în această perioadă de incubație, în timp ce alte celule au demonstrat modele de migrare a ADN care indică mai multe daune decât cele induse de iradierea inițială cu raze X. Această tehnică pare a fi sensibilă și utilă pentru detectarea daunelor și repararea în celule unice .
Description: Human LY96 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Araf CRISPR Knocked out RAW264.7 Stable cell Cell Line (Mouse) T1-19
Description: Human LY75 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY86 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY75-CD302 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY9 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6D knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6E knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6H knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6K knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6G5B knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6G5C knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6G6C knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6G6D knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human LY6G6F knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRISP1 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRISP2 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRISP3 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRISPLD1 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRISPLD2 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: This cell lysate is prepared from human 293T using Boster's RIPA Lysis Buffer (AR0105) using a standard whole cell lysate protocol. The concentration was determined using the BCA assay process and then diluted using Dithiothreitol (DTT) and a reducing SDS sample loading buffer, heated for 5 minutes at 100˚C.
Description: Human CRIM1 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRIP1 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRIP2 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRIP3 knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
Description: Human CRIPT knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
hCETP shRNA (Target C) Knock Down THP-1 Cell Line-Polyclone
Description: Human CRIPAK knockdown cell line is engineered by our optimized transduction of the specific shRNA with lentivirus. Knockdown levels are determined via qRT-PCR. Gentaur offers generation of stable knockdown (RNAi) cell lines expressing shRNAs targeting genes of your interest.
